摘要
在農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)地土壤硝酸鹽含量監(jiān)測中，比色試劑盒因操作便捷、檢測快速的優(yōu)勢(shì)，成為現(xiàn)場快速篩查的重要工具。本文結(jié)合實(shí)際應(yīng)用場景，詳細(xì)闡述比色試劑盒檢測農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)地土壤硝酸鹽的操作流程，包括樣品采集與預(yù)處理、試劑使用、比色測定等關(guān)鍵步驟，同時(shí)分析操作中的注意事項(xiàng)，通過與傳統(tǒng)檢測方法對(duì)比驗(yàn)證操作的可靠性，為基層檢測人員規(guī)范使用比色試劑盒開展土壤硝酸鹽快速篩查提供實(shí)操指南，進(jìn)一步推動(dòng)該技術(shù)在農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)地環(huán)境監(jiān)測中的普及應(yīng)用。 一、引言
農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)地土壤硝酸鹽含量過高，會(huì)導(dǎo)致農(nóng)產(chǎn)品硝酸鹽積累，影響食用安全，還可能引發(fā)土壤質(zhì)量退化與水體污染。傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測方法雖精準(zhǔn)，但流程復(fù)雜、耗時(shí)久，無法滿足產(chǎn)地現(xiàn)場快速篩查需求。比色試劑盒憑借操作簡單、便攜性強(qiáng)、檢測周期短的特點(diǎn)，可在田間現(xiàn)場完成土壤硝酸鹽檢測，為產(chǎn)地土壤質(zhì)量快速評(píng)估、科學(xué)施肥調(diào)整提供及時(shí)數(shù)據(jù)支撐。然而，若操作不規(guī)范，易導(dǎo)致檢測結(jié)果偏差，因此明確其標(biāo)準(zhǔn)操作流程與注意事項(xiàng)，對(duì)保障檢測準(zhǔn)確性至關(guān)重要。本文圍繞比色試劑盒在農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)地土壤硝酸鹽快速篩查中的操作使用展開研究，旨在形成標(biāo)準(zhǔn)化操作方案。
二、操作前準(zhǔn)備
（一）試劑與儀器準(zhǔn)備
比色試劑盒：選用適配土壤硝酸鹽檢測的專用試劑盒，檢查試劑盒內(nèi)試劑（提取劑、顯色劑 A、顯色劑 B 等）是否在有效期內(nèi)，包裝是否完好，無漏液、變色等異常情況。試劑盒需按儲(chǔ)存要求（如避光、常溫或冷藏）提前取出，平衡至室溫后使用，避免溫度波動(dòng)影響試劑活性。
輔助儀器工具：準(zhǔn)備電子天平（精度 0.01g，提前校準(zhǔn)）、便攜式振蕩儀（或手動(dòng)振蕩工具）、25mL 比色管（潔凈無劃痕，提前烘干）、1mL/5mL 移液器（配套吸頭，滅菌備用）、恒溫水浴鍋（精度 ±1℃，提前設(shè)定至 25℃）、便攜式比色計(jì)（提前開機(jī)預(yù)熱，用標(biāo)準(zhǔn)溶液校準(zhǔn)），以及土壤采樣器、樣品袋、研缽、100 目篩、濾紙等樣品處理工具。
（二）樣品采集要求
采用五點(diǎn)采樣法采集農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)地土壤樣品：在采樣區(qū)域內(nèi)，按對(duì)角線或梅花形選取 5 個(gè)采樣點(diǎn)，每個(gè)采樣點(diǎn)采集 0-20cm 表層土壤，去除石塊、雜草、根系等雜質(zhì)后，將 5 個(gè)點(diǎn)的土壤混合均勻，取約 500g 作為混合樣品，裝入潔凈樣品袋，標(biāo)注采樣地點(diǎn)、日期、作物類型等信息。樣品需在 24h 內(nèi)完成檢測，若無法及時(shí)檢測，需密封冷藏（4℃以下）保存，避免硝酸鹽轉(zhuǎn)化或流失。
三、具體操作流程
（一）樣品預(yù)處理操作
樣品研磨過篩：取混合土壤樣品約 100g，自然風(fēng)干至含水量低于 10%（手感松散，無結(jié)塊），用研缽研磨后，通過 100 目篩，收集篩下土壤，確保樣品均勻，減少顆粒度對(duì)提取效率的影響。
樣品稱量與提取：用電子天平準(zhǔn)確稱取 5.00g 過篩土壤樣品，放入錐形瓶中；用移液器加入 25mL 提取劑，蓋緊瓶塞，置于振蕩儀上，以 180-200r/min 的速度振蕩 15min（若手動(dòng)振蕩，需保持勻速，確保振蕩充分）；振蕩結(jié)束后，靜置 5min，用定性濾紙過濾上清液，收集濾液至潔凈試管中，作為待測液備用，過濾過程中避免濾紙破損導(dǎo)致雜質(zhì)混入。
（二）顯色反應(yīng)操作
試劑添加：用移液器吸取 2mL 待測液，緩慢注入 25mL 比色管中；依次加入 1mL 顯色劑 A、1mL 顯色劑 B，每加入一種試劑后，輕輕顛倒比色管 3-5 次，確保試劑與待測液充分混合，避免劇烈振蕩產(chǎn)生氣泡影響后續(xù)比色。
恒溫反應(yīng)：將比色管放入 25℃恒溫水浴鍋中，水浴保溫 10min，嚴(yán)格控制反應(yīng)時(shí)間與溫度，溫度過高或反應(yīng)時(shí)間不足 / 過長，均可能導(dǎo)致顯色過度，影響檢測結(jié)果。反應(yīng)期間避免比色管傾斜、碰撞，保持水浴鍋水位穩(wěn)定，沒過比色管內(nèi)液面。
（三）比色測定操作
比色計(jì)校準(zhǔn)：打開便攜式比色計(jì)，選擇土壤硝酸鹽檢測對(duì)應(yīng)的波長通道（通常為 540nm），用空白溶液（2mL 提取劑 + 1mL 顯色劑 A+1mL 顯色劑 B，按相同顯色步驟處理）進(jìn)行零點(diǎn)校準(zhǔn)，待儀器顯示 “校準(zhǔn)完成" 后，方可進(jìn)行樣品測定。
樣品測定：將顯色后的比色管取出，冷卻至室溫，用擦鏡紙擦拭比色管外壁（去除水珠、指紋），放入比色計(jì)的比色槽中，確保比色管刻度線對(duì)齊卡槽，關(guān)閉艙門；儀器自動(dòng)讀取吸光度值，并根據(jù)內(nèi)置標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出土壤硝酸鹽含量（單位：mg/kg），記錄檢測結(jié)果，每個(gè)樣品平行測定 3 次，取平均值作為最終結(jié)果，若平行樣偏差大于 5%，需重新測定。
四、操作注意事項(xiàng)
試劑使用規(guī)范：顯色劑需按順序添加，不可顛倒；移液器吸取試劑時(shí)，避免吸頭觸碰容器壁或待測液，防止交叉污染；剩余試劑需密封保存，嚴(yán)禁不同試劑盒內(nèi)試劑混用。
操作精度控制：樣品稱量、試劑移取需嚴(yán)格按劑量要求操作，電子天平、移液器需定期校準(zhǔn)；比色管使用前需檢查是否有劃痕，避免影響吸光度讀取；振蕩提取時(shí)，確保所有樣品振蕩條件一致（速度、時(shí)間）。
異常情況處理：若待測液顏色過深（超過比色計(jì)量程），需用提取劑稀釋（如 1:1 稀釋）后重新測定，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)；若顯色后溶液出現(xiàn)渾濁，需重新過濾待測液后再次顯色；比色計(jì)若出現(xiàn)讀數(shù)不穩(wěn)定，需檢查光源是否正常，或重新校準(zhǔn)后測定。
五、操作可靠性驗(yàn)證
選取 10 個(gè)不同硝酸鹽含量的土壤樣品，分別采用本操作流程的比色試劑盒法與傳統(tǒng)離子色譜法（實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)方法）進(jìn)行檢測，對(duì)比兩種方法的檢測結(jié)果。結(jié)果顯示，比色試劑盒法檢測結(jié)果與離子色譜法檢測結(jié)果的相對(duì)誤差在 ±4% 以內(nèi)，相關(guān)系數(shù) R2=0.95，表明按規(guī)范操作的比色試劑盒法，檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠，可滿足農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)地土壤硝酸鹽快速篩查的精度要求。
六、結(jié)論
比色試劑盒在農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)地土壤硝酸鹽快速篩查中的操作，需嚴(yán)格遵循 “樣品采集 - 預(yù)處理 - 顯色反應(yīng) - 比色測定" 的標(biāo)準(zhǔn)化流程，重點(diǎn)把控樣品研磨過篩、試劑添加順序、恒溫反應(yīng)條件、比色計(jì)校準(zhǔn)等關(guān)鍵環(huán)節(jié)，并注意試劑規(guī)范使用與操作精度控制。該操作流程簡便易行，單個(gè)樣品從處理到出結(jié)果僅需 30min 左右，且檢測結(jié)果可靠，能有效解決傳統(tǒng)檢測方法 “慢、繁、貴" 的問題，適合基層檢測人員在田間現(xiàn)場開展批量篩查，為農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)地土壤質(zhì)量監(jiān)測與安全管控提供高效實(shí)用的技術(shù)手段。
掃碼關(guān)注
